离子色谱法测定海产品中亚硫酸盐残留量_环浡海色质谱绿色新技术-QQ阅读男生轻小说网

书名：环浡海色质谱绿色新技术
作者名：刘成雁主编
本章字数：2510字
更新时间：2020-08-27 22:40:58

离子色谱法测定海产品中亚硫酸盐残留量

于凤娇^1,2，张学梅^1,2，刘思宁¹

（1．国家农兽药残留及海洋生物毒素检测重点实验室，东港 118300；
2．东港出入境检验检疫局，东港 118300）

海产品中亚硫酸的使用主要是为了保鲜以及获得色泽的美感。但人体摄入过量的亚硫酸盐，因无法全部转化成硫酸盐排泄出去，而与蛋白质巯基进行可逆反应，刺激消化道黏膜，出现恶心、呕吐、腹泻等症状^[1]。因此，各国纷纷出台各种法规和标准限制亚硫酸盐的使用。美国食品与药物管理局（FDA）和欧盟要求，对亚硫酸盐使用量高于10mg/kg的食品予以标明；我国《食品添加剂使用卫生标准》也对各类食品中的亚硫酸盐的限量做了明确的规定^[2]。

我国目前亚硫酸盐检测方法主要有碘量法、盐酸副玫瑰苯胺比色法、酶光度分析法、柱后衍生-液相色谱法、离子色谱法^[3-6]等。食品中亚硫酸盐的国标检测方法为GB/T5009.34—2003《食品中亚硫酸盐的测定》，分别为盐酸副玫瑰苯胺比色法和碘量法，但这两种方法不仅不适用于有颜色的样品，而且吸收液分别含汞和铅，毒性较大且易造成实验室污染并影响操作者的身体健康。近年来，离子色谱已经广泛应用在了食品分析领域，黄凯等^[7]采用离子色谱法检测果脯中的亚硫酸盐。罗建民等^[8]利用离子色谱法测定葡萄干中二氧化硫残留量。本方法旨在建立一套利用水蒸气蒸馏/离子色谱法对海产品中的亚硫酸盐进行定性、定量分析方法，该方法检出限低、干扰小、稳定性好，操作简单、效率高。与其他技术相比，离子色谱法可以避免使用毒性大的铅汞，且精密度高、重现性好。

1　实验部分

1.1　仪器与试剂

Dionex ICS-5000离子色谱仪（美国Dionex公司），配置电导检测器、ASRA_4mm阴离子抑制器、Chromeleon色谱工作站；氮气保护（99.99%）；Milli-Q纯水机（美国Millipore公司）；0.22μm尼龙滤膜。

18.2MΩ·cm去离子水（由Milli-Q纯水机制备）；NaOH（Fisher，质量分数50%）；无水亚硫酸钠（SIGMA，99.999%）；甲醛（分析纯）；磷酸（优级纯）。

1.2　样品前处理

称取粉碎均匀的样品5g左右，加入100ml实验用水，待水蒸气装置准备好后，接通N2保护，快速加入10ml磷酸（1+1），立即通入水蒸气，吸收液为10ml的10mmol/L的氢氧化钠溶液和1ml的甲醛，待馏出液达到100ml附近时停止接收，接收液用超纯水定容至刻度，混匀后，过0.22μm尼龙滤膜，取样进行离子色谱仪测定。

1.3　色谱条件

IonPac AS11-HC（4mm×250mm）为分析柱；IonPac AG11-HC（4mm×50mm）为保护柱；淋洗液A（水）和淋洗液B（100mmol/L氢氧化钠溶液）；流速1.0ml/min；进样量100μl；检测池温度35℃；柱温30℃；抑制电流174mA。

1.4　标准储备液及工作液的配置

准确称取0.100g无水Na₂SO₃，用1%甲醛水溶液定容至100ml即得1000mg/L标准储备液，于4℃避光保存。吸取标准储备液10ml，用1%甲醛水溶液定容至100ml即得100mg/L标准工作液，分别吸取标准工作液0.5ml、5ml、10ml、20ml、50ml，用1%甲醛水溶液定容至100ml，配置成浓度为0.5mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L、50mg/L标准系列，4℃避光保存，有效期为48h。

2　结果与讨论

2.1　流动相的选择

各阴离子的保留时间及分离效果受淋洗液的影响较大，选择合适的淋洗液对方法的建立至关重要。海产品中含有大量无机阴离子，要准确测定亚硫酸盐的含量，必须将与其他阴离子有效分离。离子色谱分析阴离子时最常用的淋洗液有Na₂CO₃/NaHCO₃缓冲溶液和NaOH溶液。Na₂CO₃/NaHCO₃缓冲溶液淋洗的强度比较大，但对于固定相亲和能力相近的离子和离子的分离效果不好；NaOH淋洗液的洗脱强度比Na₂CO₃/NaHCO₃弱，且抑制产物是水，本底电导比较低，因此选择NaOH作为淋洗液。实验表明，以NaOH溶液作为淋洗液，梯度洗脱，能够使和离子有效分离，且峰形良好。亚硫酸根与各阴离子的分离情况如图1所示。

图1　亚硫酸根与各阴离子的分离色谱图

2.2　样品前处理的选择

海产品含有较多的蛋白质、脂肪等有机大分子，这些大分子很容易堵塞色谱柱，影响检测结果及色谱柱的使用寿命。超声萃取、加热浸出等方法很难将蛋白质与脂肪除去，本实验尝试用水蒸气蒸馏对样品进行前处理。亚硫酸盐在酸性条件下易分解，释放出SO₂，因此，在蒸馏时加入磷酸（1+1）溶液。而二氧化硫又极不稳定，在空气中很容易被氧化，蒸馏过程中需要进行氮气保护。离子在中性和碱性溶液中稳定，因此吸收液选用1%的甲醛氢氧化钠溶液，馏出液过滤后进离子色谱测定，同时做回收率实验。实验结果表明，完全除去了基质中的蛋白质和脂肪，防止了大分子进入色谱柱，且分离效果较好。

2.3　稳定剂的选择

很不稳定，在溶液中极易被氧化成，影响结果的准确度，根据有关资料^[9-10]，三乙醇胺、甘露醇和甲醛等均可用作稳定剂，且甲醛的稳定效果最好。本文选用甲醛作为稳定剂，加入甲醛的量为1%（体积分数），分别于12h、24h、48h、72h测定标准工作溶液和样品中的亚硫酸盐含量，测定结果表明，在48h内亚硫酸盐的含量较稳定。