离子色谱法测定白酒中氰化物的方法研究

刘广福^*，谷岩

（辽宁省食品检验检测院，沈阳10015）

白酒作为中国特有的一种蒸馏酒，有着5000多年的悠久历史，历经几千年的发展已成为我国民族的瑰宝，体现着中国传统的深厚文化内涵和丰富的伟大历史^[1]。经过长期的发展，我国白酒企业规模日益提升，但在产业高增长的同时，白酒质量问题日益显现。据报道，2014年浙江抽查的460批次白酒中发现3.9%氰化物超标；而在此之前，河南省食药监局刚刚通报，河南省大河酒业有限公司生产的产品沱牌酒，检出氰化物超标两倍多。屡被曝光的“氰化物超标”问题令老百姓对白酒采购望而却步。食品安全国家标准GB2757—2012中对氰化物的限量值为8mg/L^[2]（以HCN计算，按照100%酒精度折算）。

氰化物是指带有氰基（CN⁻）的化合物，俗称山柰或山埃。企业生产的白酒中的氰化物一般来自生产原料，如用野生植物根茎、木薯等直接酿酒，在酿酒过程中会产生氢氰酸，导致氰化物含量超标；或是一些勾兑的低档酒，使用了氰化物含量超标的木薯食用酒精造成的。氰化物作为“毒药之王”，氰化物容易引起中毒，轻者呕吐、流涎、气促、腹泻，重者呼吸困难、昏迷、全身抽搐，甚至死亡^[3]。目前，国家唯一指定的氰化物检测方法为GB/T5009.48的分光光度法^[4]，该法普及率高、所需仪器简单，但在实际操作中存在许多问题：样品处理过程繁琐，操作复杂，费时，很多样品在试验过程中出现浑浊现象，从而导致结果无法测定，方法灵敏度较低等^[5-6]。针对上述问题，本文采用离子色谱法测定白酒中氰化物含量，本法操作简便、快速、结果准确可靠、实验过程不用有毒试剂，减少了二次污染，丰富了白酒中氰化物的检测方法^[7-9]。本研究对白酒中氰化物的检测方法进行了方法学考察，结果表明该方法准确、可靠，为白酒质量监管工作提供了检测技术依据。

1　试验部分

1.1　仪器与设备

离子色谱仪，型号：ICS-5000⁺（带电化学检测器），公司：美国热电公司；氮气吹扫仪，型号：TTL-DC，公司：北京同泰联科技发展有限公司；超纯水处理系统，型号：MILLI-Q-POD，公司：美国MILLIPORE公司。

1.2　材料与试剂

氰根标准品（50.0μg/ml）：中国计量科学研究院；12种不同品牌白酒：市售；超纯水（电导率为18.2MΩ·cm）；氢氧化钠（CAS：1310-73-2）：Fluka。

1.3　试验方法

1.3.1　样品前处理方法

准确量取白酒样品1.0ml于10ml比色管中，于45℃氮吹10min（除去乙醇及酯类），将样品完全移入容量瓶（100ml）中，并用高纯水定，经0.22μm尼龙滤膜过滤后，直接进入离子色谱仪分析，测定氰化物含量。

1.3.2　色谱条件

色谱柱：Dinonex IonPac^TM AS11-HC；保护柱：Dinonex IonPac^TM AG11-HC；检测器：脉冲安培检测器（Ag/AgCl参比电极，Ag工作电极）；流动相：（12mmol/L）NaOH等度洗脱；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；进样量：25μl^[7]。

1.3.3　标准曲线和检出限

采用外标法定量，将50.0μg/ml的氰根标准品溶液稀释成浓度（μg/L）为1.0、5.0、10.0、50.0、100.0、500.0的标准系列溶液，检测结果以浓度（μg/L）为横坐标、峰面积（A）为纵坐标，进行标准曲线绘制，检出限取3倍信噪比时所对应的氰根浓度^[8]。

1.3.4　精密度和重现性

取5.0μg/L的氰根离子标准品溶液，连续测定6次，计算其保留时间标准偏差。取同批次样品，平行试验制备6份加标样品，进行检测，计算其峰面积重复性（RSD）。

1.3.5　回收率试验

取3份白酒样品，分别添加0.5μg、1.0μg、5.0μg的氰根标准品，进行氰根的加标回收测定，通过计算求出平均回收率。

1.3.6　样品含量测定

将市场购买的不同品牌白酒样品按 1.3.1 方法处理，进行检测，计算出白酒中氰化物的含量。

2　结果讨论

2.1　检测器及淋洗液条件的选择

电化学检测器利用氰根在银电极表面的反应电流变化实现检测，具有较好选择性和极高灵敏度。通过实验可发现，当施加的电极电位在−0.15V与−0.05V之间时，氰根灵敏度处于平台稳定区域，因此方法选定氰根离子的检测电位为−0.10V。由于试验通常在强碱性条件下进行，因此本实验选用氢氧根体系阴离子色谱柱。通过实验可知，在最常见的IonPacAS11-HC高容量阴离子色谱柱上，当淋洗液浓度为10～15mmol/L时，常见共存离子如硫离子、氯离子、硫酸、亚硫酸等均不干扰氰根的测定。实验中选择浓度为12mmol/L氢氧化钠等度淋洗，单次进样分析时间可以控制在7min内完成。

2.2　白酒中乙醇浓度的影响

白酒中乙醇含量极高，通常为 30%～70%，这一特点严重影响氰根出峰时间和响应。对氰根浓度为50µg/L进行研究，结果显示，乙醇浓度为0～70%时，其保留时间均无明显差别，但其峰高响应则有较大差异。当乙醇浓度小于1%时，响应变化小于0.1%，影响基本可以忽略。当乙醇浓度到2%时，氰化物峰高响应降低约2%。而浓度进一步增加到10%时峰高响应则降低达5%，影响其测定的准确性。因此采用百倍样品稀释处理，此时进样样品中乙醇含量均能小于1%，结果较为准确。

2.3　线性关系考察

通过氰根标准品系列溶液分析，用质量浓度（c）和峰面积（A）进行线性方程回归，其相关结果见表1。氰根在浓度为1～500μg/L时具有良好的线性关系，其中相关系数为0. 9992，检出限为0.5μg/L。

2.4　精密度、重复性和加样回收率

经测定，氰根的保留时间标准偏差为0.18%，取同一空白样品，制成6份加标样品，进行检测，重复性试验RSD为0. 67%。经测定，氰根的平均加标回收率为98.5%（RSD为0.36%），回收率结果见表2。

2.5　白酒中氰化物的含量

分别对市场上购买的不同品牌白酒样品进行测定，其氰化物含量均未检出，结果表明，本次检测的12种不同品牌白酒中氰化物含量，其结果均符合国家标准要求。

3　结论

本文建立了一种测定白酒中氰化物方法：取白酒样品1.0ml于10ml比色管中，于45℃氮吹10min（除去乙醇及酯类），将样品完全移入容量瓶（100ml）中，并用高纯水定，经0.22μm尼龙滤膜过滤后，直接进入离子色谱仪分析，测定氰化物含量。

该方法操作简便、快速、结果准确可靠、实验过程中不使用有毒试剂，避免了二次污染。结果表明，使用本方法测定白酒中氰化物的含量，其平均回收率高于98%，有较高的精密度和准确度，与国标GB/T5009.48规定的分光光度法相比，本法操作更简单，实用性更强，检测结果更准确可靠，更适于检验机构进行白酒中氰化物的批量检测工作。

参考文献

[1] 程劲松, 李春扬. 食品安全质量检测学报, 2014, 5(7): 2248-2262.

[2] GB2767—2012. 食品安全国家标准蒸馏酒及其配制酒[S]. 2012.

[3] 胡明燕, 车明秀, 刘睿, 等. 酿酒科技, 2014, 10: 105-107.

[4] GB/T 5009.48—2003. 蒸馏酒及配制酒卫生标准的分析方法[S]. 2003.

[5] 王慧, 张静, 武瑾瑜, 等. 酿酒科技, 2013, 9: 59-60.

[6] 周韩玲, 练顺才, 李杨华, 等. 酿酒科技, 2015, 3: 90-92.

[7] 尤素群, 钟志京, 刘秀华, 等. 四川大学学报(自然科学版), 2006, 43(6): 1352-1356.

[8] 王硕, 刘广福, 孙蕊, 等. 军事医学科学院院刊, 2006, 30(3): 288-291.

[9] 王明国, 李社红, 肖唐付, 等. 军事医学科学院院刊, 2006, 30(3): 288-291.

^*通信作者：刘广福，男，工程师，食品分析与检测，E-mail：gfliu_neu@126.com