HPLC法测定宫瘤消片中芍药苷的含量

尤海丹

（辽宁省标准化体系建设工程技术研究中心辽宁省分析科学研究院，沈阳 110015）

宫瘤消片其处方是由牡丹皮、白术、香附、党参、莪术等十一位中药组成，具有活血化瘀，软坚散结等功效，用于气滞血瘀子宫肌瘤见有腹部疼痛者。多年的临床应用表明其疗效确切，为了规范药品的使用，加强质量控制，保证产品的稳定性，本实验对其质量标准进行了研究。

1　样品与仪器

1.1　仪器

Agilent 1100液相色谱仪：Agilent 1100泵、Agilent1100 DAD检测器、Agilent 1100色谱工作站。

1.2　试药

甲醇为色谱纯（天津康科德化学试剂），乙腈为色谱纯（天津康科德化学试剂），水为重蒸水（娃哈哈纯净水），磷酸为分析纯。对照品（自己制备）。宫瘤消片为自己制备。

2　方法与结果

2.1　对照品溶液的制备

取芍药苷0.05g，定容于50ml的容量瓶中得0.1mg/ml的对照品溶液。进样前用0.45 μm微孔滤膜滤过。

2.2　供试品溶液的制备

将宫瘤消片研细，精密称定约1.163g，置50ml具塞锥形瓶中，加甲醇20ml，精密称定重量，密塞，超声提取20min，放置至室温，补足减失的甲醇，摇匀，滤过，续滤液经0.45 μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。

2.3　色谱条件

色谱柱：Agilent C18柱（150mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-0.1 %磷酸水溶液（15 : 85）；流速1.0ml/min；检测波长230nm；柱温27℃。

2.4　系统适用性试验

2.4.1　线性关系的考察

精密吸取“2.1”项下对照品溶液2μl、4μl、6μl、8μl、10μl分别进样，记录色谱图测定峰面积，以平均峰面积为纵坐标（Y），以对照品质量为横坐标（X），绘制标准曲线，其回归方程为Y = 1113.4X − 4.92，R² = 0.9992。结果表明，芍药苷含量在0.2～1μg范围内，供试品含量与吸收峰面积线性关系良好。

2.4.2　精密度试验

按“2.2”项制备供试品溶液，精密吸取供试品溶液10μl，连续进样5次，记录色谱图，供试品峰面积的RSD为1.42%。结果表明，仪器整个检测系统的精密度良好。

2.4.3　稳定性试验

按2.2项制备供试品溶液，在上述色谱条件下，分别在制备样品后的0h、2h、4h、8h、10h进行测定，记录色谱图，结果表明，样品峰面积的RSD为1.42%，说明样品于甲醇溶液中10h内稳定。

2.4.4　重复性试验

按2.2项制备供试品溶液，平行制备5份，分别照含量测定方法测定，进样量10μl，记录色谱图，结果显示，供试品的分析结果稳定，供试品峰面积的RSD为1.29%，表明该方法的重复性良好。

2.4.5　回收率试验

分别称取已知含量的宫瘤消片5份，研细，加入对照品溶液1ml，参照2.2项制备供试溶液。进行测定，记录色谱图，结果表明，平均回收率为99.26%，RSD为1.65%，说明该方法可行。具体见表1。

2.5　样品含量测定

取5批宫瘤消片样品，按上述方法测定其含量，结果见表2。

3　讨论

3.1　检测波长的确定

取芍药苷对照品适量，加甲醇溶解得到0.1mg/ml的对照品溶液，在200～400nm扫描，结果表明，芍药苷在230nm处有一最大吸收峰，所以本实验选定230nm为检测波长^[1]。

3.2　流动相的选择

为了得到良好的色谱图形和适宜的保留时间，我们分别比较了甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.1 %磷酸水溶液，不同比例的分离效果，结果表明以乙腈-0.1%磷酸水溶液（15 : 85）为流动相时，保留时间适中，分离效果好，故选其为流动相^[2]。具体见图1。

3.3　宫瘤消片中芍药苷的含量

芍药苷性质稳定，含量最高，是宫瘤消片中主要有效成分之一，因此以其作为对照品，通过测定其含量来进行质量标准研究。

由于提取方法不同，提取出的芍药苷含量也不同，因而分别对供试品的溶液制备方法中提取溶剂、提取方法和提取时间进行考察 ^[3]，见表3～表5。结果表明甲醇超声提取20min效果比较好。

参考文献

[1] 吴巧凤, 严云良. 中成药, 2006, 28(9): 1379-1380.

[2] 李平, 魏琴. 中国药师, 2006, 9(11): 1019-1021.

[3] 童荣生, 孙世明. 中国医院药学杂志, 2006, 26(11): 1370-1372.

作者简介：尤海丹，女，助理研究员，主要从事分析测试工作，Tel：(024)24210497，E-mail：yhd517@163.com