第二章　生物化学与分子生物学实验的基本操作

第一节　玻璃仪器的规格和使用

生物化学与分子生物学实验中使用的各种玻璃计量仪器都有固定的规格和一定的技术标准，在出厂前都须经国家计量机关检定认可，印上检定标记，并且根据计量的允许误差范围，标有“一等”或“二等”（或“Ⅰ”“Ⅱ”）等字样。

玻璃计量仪器计量的检定条件是以20℃为标准，以毫升为计量单位。

一、刻度吸管

刻度吸管是生物化学与分子生物学实验中使用最广泛的吸量管，其准确度较高，使用灵活方便。常用的容量规格有0.1ml、0.2ml、0.5ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml和10.0ml等数种。

使用刻度吸管应根据需要正确选用不同容量规格的吸管，否则会使误差扩大，影响实验结果。一般应选用取液量最接近的吸量管，如吸取0.1ml的液体用1.0ml的吸管会使误差增大，需要1ml的溶液而用0.5ml的吸管吸取两次也会使误差增大。

刻度吸管有完全流出式和不完全流出式两种。完全流出式包括吸管尖不能自然流出的液体，使用时要把最后不能流出的液体吹出，通常在管壁上标有“吹”的字样。不完全流出式不包括吸管尖最后不能自然流出的液体，使用时不能吹，而是将吸管尖靠在容器壁上稍微停留一下，直到液体不再继续流出为止。

使用刻度吸管时，用右手持吸管，将刻度面对自己，把吸管尖插入液面下约1cm为宜。用左手持吸球，先把球内空气压出，再把吸球的尖端对准吸管上口，慢慢松开左手指，将液体吸至所需量的刻度线以上1～2cm处，在移开吸球的同时快速用右手食指按住吸管上口，将吸管尖移离液面，垂直并轻轻旋转吸管，将多余的液体放出至液面的弯月面与标线相切时为止，再将吸管垂直移至准备好的容器内，使吸管尖与容器内壁接触，让液体自然流出。

二、移液器

移液器常用于吸取1ml以内的微量液体。具有使用方便、取液迅速、不易破损、能吸取多种样品等优点。适用于连续取样和试液分装，目前被广泛应用于临床生物化学检验中。移液器规格可根据需要选择，生物化学与分子生物学实验常选用10μl、200μl、1000μl的微量移液器。

微量可调加液管在正式使用前，要连续按动多次，使管内空气同工作环境空气进行交换，保持管内空气负压恒定。使用时将塑料吸液嘴套在加液管头上，轻轻转动，以保持密封。垂直地握住加液管，将按钮按到第1停止点，并将吸液嘴浸入液面下2～3mm，缓慢地放松按钮，使之复位，1～2s后从液体中取出。再将加液管移至准备好的容器内，缓慢地将按钮按到第1停止点，等待1～2s后再将按钮完全按下，排出液体。不同的试液应更换塑料吸液嘴。

三、量筒

量筒在准确度要求不高的情况下，用来量取相对大量的液体。不需要加热促进溶解的定性试剂可直接在量筒中配制。量筒的规格有10ml、25ml、50ml、100ml、250ml、500ml、1000ml等多种。

四、容量瓶

容量瓶是一种较准确的容量仪器，带有磨口瓶塞，上部是细小呈圆柱形的颈部刻有环形的刻度，下部是膨大呈壶腹状的瓶身。使用前应检查容量瓶的瓶塞是否漏水，瓶塞应系在瓶颈上，不得任意更换。用容量瓶配制溶液时，固体物质必须先在小烧杯中溶解或加热溶解，冷却至室温后才能转移到容量瓶中，然后加溶剂稀释至标线。当溶剂加到快要接近标线时应停顿30s左右，待瓶颈上部液体流下后，再小心逐滴加入，直至溶液的弯月面最低点与标线相切为止。容量瓶绝不能加热或烘干。容量瓶的规格有10ml、25ml、50ml、100ml、250ml、500ml、1000ml等多种。