一、在体研究：低氧对小鼠创面愈合的作用

采用的聚偏二氯乙烯（polyvinylidene chloride）膜对氧气的通透率为 40～90ml/m²×24h×1atm（1atm＝101.325kPa），聚甲基戊烯（polymethylpentene）膜对氧气的通透率为60 000～65 000ml/m²×24h×1atm，是聚偏二氯乙烯膜的约700～1 500倍，两者对二氧化碳和水蒸气的通透率相似。氧气可自由通过聚甲基戊烯，但聚偏二氯乙烯（低氧膜）对氧气基本不通透，故认为二者覆盖在创面上时，可分别营造常氧和低氧环境。建立小鼠创面低氧模型（图5-14），结果表明：低氧处理后创面愈合速度加快。将低氧处理1小时1次、1小时2次、3小时、6小时各组中低氧创面愈合情况进行统计比较，可见低氧1小时1次、1小时2次、3小时的愈合速度相似，均快于低氧6小时，比较各组中常氧创面愈合情况，可见相似的趋势（图5-15）。

低氧处理对创面愈合影响的组织学观察结果如下，HE染色：伤后第5天，低氧处理6小时组表皮厚度较常氧组明显增加（考虑与角质细胞的增殖有关），另外通过血管腔中的红细胞判断微血管的分布及数量，可知低氧组皮下微血管密度较高（图5-16）。增殖细胞核抗原（PCNA）免疫组织化学染色：通过PCNA的免疫组织化学染色检测创面细胞增殖的情况，伤后第5天，低氧处理6小时组创面处于增殖期的细胞数目明显增多（图5-17）。通过Masson染色，观察胶原分布情况，无论低氧组还是常氧组，创面处的胶原纤维均较多，粗细不等，排列致密紊乱，周围被均质化的基质包围，两组之间胶原数目及排列均无明显差异（图5-18）。

综上所述，创面经1小时、3小时、6小时低氧处理后，剩余创面面积较常氧组小，愈合速度较快。在发现单次低氧处理对创面修复具有促进作用的基础上，进一步应用多次重复低氧，观察其对创面修复的影响，发现伤后低氧处理1小时之后的次日再低氧处理1小时，其结果与低氧1小时相似。再上皮化过程的完成速度与创面的深度、有无损伤肌肉层、血管等密切相关。低氧可能影响创面修复的多种过程。低氧处理后创面表皮层厚度明显增加，可能与低氧调节了角质细胞的增殖、迁移相关。PCNA的免疫组织化学染色结果发现，低氧组处于活跃的增殖期的细胞数目更多，表皮层厚度增加。此外，本实验HE染色、Masson染色可见低氧创面中含有较多血管，表明低氧可以促进血管生成。低氧处理6小时整体愈合速度小于低氧1小时、3小时处理组，提示低氧处理时间较长时，加速创面愈合的作用会减弱甚至可能减慢愈合速度。